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铸型标本
[ 录入者:bjbbys | 时间:2007-08-14 14:39:36 | 作者: | 来源: | 浏览:564次 ]
 
铸型标本又称腐蚀标本,就是通过向动物某一器官的内腔、血管或排泄管灌注某种可塑性的材料,使其在腔道中模塑成型,然后用强酸腐蚀、自然腐败或解剖的方法,将器官组织除去,这样所遗留下来的就是该器官腔道的铸型。它能清楚地反映器官的内腔或其血管和分泌管的分枝及分布,因此是形态学研究工作中所经常采用的一种技术。
制作铸型标本的材料大致可分冷塑性和热塑性两类。前者如赛璐珞、火棉胶、过氯乙烯树脂、甲基丙烯酸甲酯(即有机玻璃单体)、天然橡胶乳等;后者如松香蜡合剂和某些低融点合金。在实践上,冷塑性材料应用较广,尤其对管道细小、分枝密度大的器官,如肾、肝、胰等器官的血管和管道;热塑性材料则主要用于塑造大口径管道和某些器官的腔室,如肾盂、心腔、脑室、头窦等。近年来,随着石油化工的快速发展,提炼出多种性能优良的合成树脂,为改进铸型标本创造了良好的物质基础,从而提高了铸型标本的质量,解决了标本变形、脆裂的问题。
1、取材
新鲜或固定过的材料均可,以放血致死的为好。并要选体瘦脂肪少的动物,因脂肪多的动物血管包埋于脂肪中不易分离。根据需要可锯取头部、四肢的某一段、胸腔、骨盆腔等部位。填充血管前不能剥皮,并要保持皮肤完整。
2、冲洗
锯下的材料,从动脉断端插入套管,用生理盐水冲洗血管内残血。冲洗时逐步提高吊桶位置,直到自静脉断端流出的溶液不带血色为止。冲洗过的标本倒着悬挂起来,排净残余溶液,暴露的断端用湿布包好防止干燥。
如材料系取自自然死亡的动物,其血管中有大量血栓,应先灌注溶栓剂,使血管扩张,血栓溶解,以利灌注填充剂。
常用的几种溶栓剂配方如下:
              1. 95%酒精                        200.0毫升
                重铬酸钾                                8.0
              2. 3%硫酸钠                       7毫升
              3. 硫酸钠                                  3.3
                 乳酸                                1.0毫升
                 加水至                          100.0毫升
一、用赛璐珞或火棉胶制作铸型标本
(一)赛璐珞或火棉胶胶液的配制
赛璐珞在化工原料商店有售,也可利用废乒乓球,用前先洗净晾干,然后剪成小片,以1:10的量加入丙酮,每隔2小时用玻棒搅拌一次,使其完全溶解。如没有丙酮,可用无水酒精和乙醚的等量混合液代替,但效果较差。配制好的胶液似炼乳状,用玻棒挑起时,呈细条状淌下,如涂少许在玻板上,当丙酮挥发后,即形成一层薄膜,可用小刀刮下。如胶液太稠,则不易灌注到细小的分枝,太稀则因赛璐珞成分少,灌注后标本主干常不饱满,分枝也较脆弱。
如器官同时有两种以上的管道需要灌注,可在胶液中加入不同颜色的油画颜料,但添加量不宜太多,边加边搅拌,至胶液呈现鲜艳的颜色即可。如无油画颜料,也可用粉质宣传画颜料代替。常用的颜色为朱红、普蓝、铬黄、铬绿、锌白。
火棉胶系纯净的硝化赛璐珞,化工商店有售,常配制成不同浓度,一般用无水酒精和乙醚的等量混合液或丙酮作为溶剂。也可用废照相底片或电影胶卷代替,但应先检试一下,能强烈燃烧者为硝化赛璐珞,否则为醋酸赛璐珞,不能采用。利用废胶片应先用热水浸泡1小时,洗去药膜。
调制好的赛璐珞或火棉胶胶液,可以保存在任何盛有机溶剂的瓶中(盛苯、丙酮、乙醚、氯仿瓶),因其密闭性好,可防止挥发干固,又便于随时取用。赛璐珞、火棉胶和丙酮等都是易燃品,因此在调制、储存和灌注时应严格注意防火。
(二)标本的准备
原则上应尽量采用新鲜而无破损的脏器。首先清理该器官门区的疏松组织和脂肪,暴露出器官的血管或管道要在1厘米以上。然后检查管道中有无血块或分泌物堵塞,用镊子小心夹出,并轻轻压挤,使管腔内遗留的液体尽量排出,否则会影响灌注效果。也可用温生理盐水从动脉端注入,冲洗去残血,再轻轻压挤出水分。
将分离出的血管或管道套上相应粗细的短玻管(长5厘米左右),玻管两端应预先烧制一细颈,另一端套上适合的乳胶管,玻管两端均用粗棉线扎紧。
(三)灌注
灌注胶液以10毫升和20毫升的玻璃注射器较为适宜,因其大小适中,且玻璃活塞比较灵活,灌注时通过活塞感知被注器官管道中的压力,可以控制注射量,避免因压力过高造成管道破裂。
配制好的胶液因粘滞性存在,不易吸取,通常直接倒入注射器内,再装上活塞。开始灌注时,管道中的内压小,胶液可以较快注入,当灌注量逐渐加多,管道中内压也增大,应缓慢注入,同时用手顺着管道的方向轻轻按摩器官,使胶液附着均匀。当感到注射器活塞推不动时,即应暂停灌注,否则会使管道胀破,此时可用止血钳夹住乳胶管,并退下注射器。之后,每隔24小时可重复灌注一次,次数依器官及管腔大小而定,通常约三、四次,最后一二次可用较浓的胶液,直到大管道在间隔时间内无瘪塌现象,灌注即告完成。在灌注过程中器官应置于水中。
如该器官有两种以上的管道需要灌注,应先灌注较细的管道,如动脉、排泄管,再灌注较粗的管道,如静脉、腔室。
灌注完毕后,将器官静置23天,待丙酮挥发,大管道饱满并呈坚实感之后,即可进行腐蚀。在灌注与放置时,为了保持器官原形防止干燥,可将其置于水中,或用棉花、纱布等柔软物品衬垫。
为了缩短标本制作时间,可以在一次重复灌注之后,将标本材料置于水浴中加温至80左右,以加速丙酮挥发,这样维持1小时左右,就可进行腐蚀。
每次灌注完毕,注射器内剩余的胶液应即注入储存瓶内,并将注射器活塞抽出,用丙酮冲洗并抽吸数次,否则极易粘着,很难退下。
(四)腐蚀
通常用粗制浓盐酸进行腐蚀,盐酸量只要能浸没标本即可。腐蚀速度与标本大小、厚薄,盐酸的浓度和温度有关。标本大而厚者腐蚀慢,盐酸浓度和温度高则腐蚀快。因此,为了加速制作过程,可以适当加温盐酸。方法是将灌注好的器官与盐酸同置于烧杯或陶瓷器皿中,放在水浴中加温至70,维持1小时,这样小而薄的器官当时就可腐蚀完毕,较厚的器官在脱温后2天左右也可使全部组织分解掉。
如无盐酸,也可用2025%的氢氧化钾或氢氧化钠溶液,或将灌注好的器官置于清水内,让其自然腐败,但时间较长。
(五)洗涤和保存
标本经盐酸腐蚀23天后,可以进行初步冲洗,把被腐蚀成泥土状的组织冲洗掉。洗涤时可将一条橡皮管接于自来水龙头上,皮管的另一端系上一个14号注射针头,这样水流较细,不致冲坏标本的细小分枝。初步冲洗后,如尚有未被腐蚀掉的组织,应将其重新放入盐酸中继续腐蚀,过12天后再进行冲洗,直到全部组织腐蚀和冲洗干净为止。
已冲洗干净的标本,应移入3%氢氧化钠溶液中浸泡1分钟,以中和标本上残留的盐酸,否则,标本的分枝末梢日久易发脆断落。然后再把标本移置在净水中浸泡1天,洗去碱液,取出晾干。陈列用的标本可装架于标本板上,加玻璃罩保护,或浸泡在2%福尔马林溶液中。

 

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